茶叶中茶黄素的分离

　　茶叶中茶黄素的分离
　　(1)将粗提取物5g为1份，加入SephadexLH-20柱(用60％丙酮水溶液浸泡过夜)上，再用60％丙酮进行淋洗，流速lml／min，按每15ml收集1次洗脱液，测定光密度。会集E380nm／E460nm比值在2．5—3．0范围内的部分，30℃下馏去丙酮，再用乙酸乙酯萃取，经无水硫酸镁干燥，在30C下浓缩至干，得到明亮鲜红色物。再经pH7，硅胶(SillicARCC-7100—200目)柱(0．8mX4cm)色谱分离，每1．0g溶于少量的丙酮：甲醇：水(25：6：2)系统，加入柱上，用三氯甲烷：丙酮：甲醇：水(40：25：6：2)进行淋洗，每15ml收集1次，可清楚地分离出每个橙红色的部分。分别收集后于301Z下浓缩至于。洗出物的顺序是：第一部分为TFl，第二部分为TF2，第三部分为T民。从柱上回收率约为82％。这三种产物分别经过硅胶柱分离提纯一次，TFl分离物用含水甲醇再结晶后，得到TFl。；TP＼再结晶得到茶黄素—3，3’—双没食子酸酯；TF2再结晶得到茶黄素-3-没食子酸酯和茶黄素—3，—没食子酸酯的混合物。
　　(2)将粗提取物5g为1份加入柱(用35％丙酮水溶液将SephadexLH-20浸一夜装柱)上，用35％丙酮水溶液淋洗，流速lml／min，洗脱液每15mi收集1次，测吸光度。先洗出的是两个淡黄橙色带BI和B2(最大吸收为400nm)，随后洗出的是三个深橙色带B3、B4和B5(最大吸收为380nm和460nm)。合并同一色带的洗脱液，30C下馏去丙酮，再用乙酸乙酯萃取，萃取液用硫酸镁干燥后浓缩至于，得到色素Pl、P2、P3、P4、P5。分别用聚酰胺薄层(展谱剂为甲醇)、硅胶(SillicARCC-7)薄层(展谱剂为三氯甲烷：丙酮：甲醇：水=40：25：6：2)，以及纤维素薄层(第一相为正丁醇：冰乙酸：水二4：1，2：2，第二相为2％乙酸)进行鉴定。表明n为茶黄酸；P2为表茶黄酸—3—没食子酸酯；P3为茶黄素1b和茶黄素1c的混合物，可通过3mm厚的制备性纸谱分离(正丁醇：冰乙酸：水=4：1：2．2为展谱剂)进一步分离出这两种物质；P4为茶黄素—3或-3'-没食子酸酯；P5为茶黄素—3，3’—双没食子酸酯。