【壹沱】科眼识茶之《下关生沱茶和熟沱茶成分分析和体外功能性效果比较研究》

  116年来,下关沱茶一直坚持:大气明理做人,一心一意做茶。

  小编将继续带领大家用科学的眼睛看普洱茶,从科研的角度认识下关沱茶,一睹下关沱茶的风采。

  王睿、赵欣[1]等人依托重庆高校创新团队建设计划资助项目(KJTD201325)对云南下关沱茶(集团)股份有限公司2012年产生沱茶和熟沱茶经粉碎后用20倍80%的甲醇进行提取,反复提取三次后合并提取液,用旋转蒸发仪蒸干甲醇溶液后得到沱茶的提取物。

  再对提取物通过液质联用(LC-MS)进行沱茶成分测定、羟基自由基清除能力测定、DPPH自由基清除能力测定、Ames抗突变实验和MMT法测定沱茶提取物的体外癌细胞增值抑制效果。研究结果如下:

  1  下关生沱茶和熟沱茶成分的比较

  通过LC-MS分析,通过MS/M分解图中各样品质谱图和对照标准品比对,观察到在生沱茶含有没食子酸、表没食子儿茶素、儿茶素、咖啡因、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、槲皮素-3-半乳糖甙、山柰酚-3-芸香糖甙、山柰酚-3-葡萄糖苷、槲皮苷和叶黄素这十二种化合物。

  经过发酵后在熟沱茶中除了生沱茶中出现的十二种化合物外还出现了两种新的化合物,为二羟基苯酸和山奈酚,另外经过发酵后熟沱茶中的没食子酸、二羟基苯酸、槲皮苷、山奈酚和两种未知成分的含量较生沱茶明显提高,表没食子儿茶素没食子酸酯和一种未知成分的含量大幅度下降,含量下降的未知成分有待进一步研究(如图1)。

  图1下关沱茶的HPLC-PDA色谱图(200~600nm)

  注:A:下关生沱茶;B:下关熟沱茶。

  2  下关生沱茶和熟沱茶成分的比较

  通过测定下关生沱茶和熟沱茶提取物的羟基自由基和DPPH自由基清除能力可以判断沱茶的抗氧化效果。

  100、200、500μg/mL三个浓度下,随着浓度的升高,生沱茶和熟沱茶的羟基自由基和DPPH自由基清除能力均得到提高;

  在不同实验浓度下,熟沱茶的清除自由基能力都强于生沱茶(图2、图3)。

  图2下关沱茶提取物的羟基自由基清除效果

  注:a~c,A~C:表示不同字母表示各组数据平均值存在显著差异(p<0.05);图3同。

  图3下关沱茶提取物的DPPH自由基清除效果

  3  下关生沱茶和熟沱茶抗突变效果的比较

  总体上,下关生沱茶和熟沱茶的提取物对MNNG诱导的TA100菌具有一定的抑制作用。

  由表1可知,提取物浓度为1.25、2.5mg/皿时生沱茶的抑制率为33.6%和61.2%,熟沱茶对TA100的抑制率比生沱茶有所提高,分别为39.7%和74.2%。

  表1沱茶提取物在致突变物N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍

  (MNNG,0.4μg/皿)诱导TAIO0菌株下抗突变效果

  注:不同字母表示各组数据平均值具有显著性差异(p<0.05);表2同。

  4  下关生沱茶和熟沱茶癌细胞体外增殖抑制效果的比较

  观察体外癌细胞增殖的变化情况可以从一定程度上判断食品的抗癌功能性。下关生沱茶和熟沱茶提取物分别对体外生长的AGS胃癌细胞和HT-29结肠癌细胞进行处理,观察其体外增殖抑制效果。

  由表2可知,用MTT法观察不同浓度提取物处理癌细胞后的OD值读数可以看到样品处理各组细胞的OD值较对照组OD值明显下降(p<0.05),高浓度生沱茶和熟沱茶提取物处理癌细胞后,AGS和HT-29细胞的OD值均低于低浓度处理时,通过计算可得出高浓度样品处理时具有更高的体外癌细胞生长抑制率,而且熟沱茶提取物对AGS和HT-29癌细胞在两个浓度上的生长抑制效果均高于生沱茶提取物。

  表2沱茶提取物对AGS和HT-29癌细胞的体外增值抑制效果

  从实验结果可以看出,沱茶中含有十多种有效成分,其中包括多种茶多酚类物质,这些物质是茶叶中重要的功效成分,这些功效成分使生熟沱茶都具有很好的体外抗氧化、抗突变和抗癌效果。

  熟沱茶由于经过了发酵过程,其化学成分与未发酵的生沱茶也有一定的差异。由于发酵前后沱茶的成分发生改变,发酵前后生沱茶与熟沱茶的抗氧化、抗突变和癌细胞生长抑制作用也出现差异,熟沱茶中产生了没食子酸和槲皮苷等化合物,这些功能性物质加强了熟沱茶的体外功能性作用,所以熟沱茶具有很好的体外抗氧化、抗突变和抗癌能力。

  综合本研究中各项结果可以看出下关沱茶是一种含有多种功能性成分的健康食品,并且经过发酵后得到的熟沱茶的功能性成分更多,具有更高的价值。

  【参考文献】

  [1]王睿,赵欣.下关生沱茶和熟沱茶成分分析和体外功能性效果比较研究[J].食品工业科技,2014(6):150-154.

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